显微镜百科
请问HA-p53所指的HA是什么缩写?
所属分类:显微镜百科 点击次数:218 发布日期:2022-06-20
网站网友点击量更高的文献目录排行榜:
点此链接
请问HA-p53所指的HA是什么缩写?若前方加上pcDNA 是否变为vector?拜託了解分子生物的知识达人解答!如果能连同实验步骤.方法与运用详加说明更佳,谢谢!
HA是vector上提供的HA-tag是vector上的一段序列通常在vector的MCS(multiple cloning site)后面,有些tag也在前面...基因接进MCS中,如果基因表现之后,会和基因产生的protein形成fusion protein...就是说基因产生的protein后面会多一段HA序列...加上HA-tag的目的,是为了在protein做一个标记...作为日后实验时...侦测或是纯化protein时用的marker...其他功能类似的tag还有myc,6Xhis,V5 epitope,GST,GFP,RFP,YFP,lacz,bioluminescence ...等
HA-tag是一段九个胺基酸的序列,胺基酸序列是(YPYDVPDYA)可以用HA-tag的antibody去侦测或是纯化蛋白...所以你的plasmid,pCDNA-HA-P53所产生的protein是和HA-tag形成fusion protein的p53protein
接上这些tag的目的...当然是为了侦测或纯化protein用的就像有些protein我们会construct在GFP的vector上...产生GFP的fusion protein...之后我们只要在萤光显微镜下观察,就能知道基因的表现情形...或是做动物实验时,可用于追踪细胞...
或是可用于大量纯化protein...例如接上GST或6XHIS...GST是Glutathione S-transferase ,会和Glutathione结合...6XHIS是6个histidine,可和Ni(镍)结合...Glutathione或Ni接上bead后,可用于纯化这种protein...
你的p53protein 形成的HA-tag fusion protein当你做细胞染色时,可用HA-tag antibody来侦测p53的表现情形...或是如果要做protein-protein interaction 方面的实验,如免疫沉淀...因为当使用p53 antibody时,antibody接上p53 protein 时,p53 protein有可能会发生结构改变,或是和其他protein interaction的位置被antibody挡住...可能使protein失去和其他protein interaction的能力所以或做一个HA-tag fusion protein...再用HA-tag的antibody去认fusion protein的HA-tag...这样就不会因为接上antibody发生结构改变,或是和其他protein interaction的位置被antibody挡住的情形发生...
关注页面底部公众号,开通以下权限:
一、获得问题咨询权限。
二、获得工程师维修技术指导。
三、获得软件工程师在线指导
toupview,imageview,OLD-SG等软件技术支持。
四、请使用微信扫描首页底部官方账号!
相关新闻
- 金相显微镜的结构、原理及应用 [2023-07-07]
- 金相显微镜如何观察金相组织 [2023-07-07]
- 金相显微镜的基本原理与应用 [2023-07-07]
- 金相显微镜会遇到的哪些误区 [2023-07-07]
- 金相显微镜厂家:金相试样的平整与磨光 [2022-07-30]
- 仪器创新对我国的发展有着重要的意义 [2022-07-30]