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GFP融合基因都是融合的整个基因么？还是其中的一段？
所属分类：显微镜百科 点击次数：299 发布日期：2022-07-02
大家好，这里是老上光显微镜知识课堂，在这里你可以学到所有关于显微镜知识，好的，请看下面文章：关于GFP融合的蛋白的一些问题，想把GFP基因融合的已有蛋白的后面，问一下比较弱的几个问题：
1、GFP融合基因都是融合的整个基因么？还是其中的一段呢？
2、是不是不能破坏GFP基因的起始ATG啊？
3、需要注意那些方面的问题恩？
融合蛋白的意思是一起转录一起翻译，然后两个蛋白是黏在一起不是分开的
你的目的蛋白翻译出来就会在C或N端带了GFP，看你的质粒怎么设计的
一般ATG质粒上面有了（不然就自己设计）
而且多克隆位点都不会在GFP内部所以不会破坏GFP的起始密码子
就按照普通的表达蛋白的克隆做就行了
意思就是：我直接在要表达蛋白的C端按照不移码原则连接上GFP就可以了，是这样吧！！！多谢了！！
你的质粒不带GFP的吗？如果自己连，注意不要把poly A信号加在两个之间了，否则就杯具
有现成的GFP载体，直接连到clone位点就ok了，如果重新构建，一般注意是连到基因的N terminal和C terminal会有不同的效果，所以，一定要有control作对照，还有不要破坏GFP的起始密码子
对，是自己连。。
对照应该怎么设计呢？就是连在两端看有分别有什么影响么？
有啊，有些蛋白很奇怪的，融合了东西就没功能了……有的只能融合在C有的只能在N……
所以你应该设计，空质粒、插入目的片段的质粒、融合在C、融合在N、只有GFP的组。
阿拉伯芥的ACR11-，ACR12-GFP融合
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