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粗提DNA,为什么一部分菌株离心不下去?
所属分类:显微镜百科 点击次数:244 发布日期:2022-07-02
大家好,这里是老上光显微镜知识课堂,在这里你可以学到所有关于显微镜知识,好的,请看下面文章:Zui近在做BT菌基因的筛选,利用水煮的办法粗提DNA,但是发现水煮后一部分菌株离心不下去,特请教一下原因?
为什么煮沸?
以前提过,70-80度之间的,现在都忘记了
你说的菌株长得什么样子?什么颜色?你的转速多高?个人认为你的离心力不够大,煮沸后的变性蛋白没有被离下去。
哦,我没说清楚,这个办法适用于提取质粒DNA,煮沸可以破解细胞壁,并使蛋白和核DNA变性,而质粒DNA因为其互相缠绕的拓扑结构而不会变性。
有没有好的办法测定菌浓?
为什么要煮沸?SDS裂解法不是很好吗?对目标细菌进行绿色荧光蛋白标记的实验过程
小弟Zui近在做BT菌基因的筛选,利用水煮的办法粗提DNA,但是发现水煮后一部分菌株离心不下去,特请教一下原因?
我不知道你这个问题是不是偶然的,我之前用冻融法破碎细胞就遇到了这种问题,我先冷冻然后用沸水加热破碎细胞,结果在离心的时候,离心管中的菌体就分为上下两层,在离心管中的液面上方也有一层菌体没有被离心到离心管的底部。
如果对后续的实验没有影响就没事了撒 但是如果影响很大的话 就建议还是用试剂盒 或者配置溶剂进行提取
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