显微镜百科
最近电泳跑出的条带老是这个样子,究竟是怎么回事呢
所属分类:显微镜百科 点击次数:245 发布日期:2022-07-02
大家好,这里是老上光显微镜知识课堂,在这里你可以学到所有关于显微镜知识,好的,请看下面文章:Zui近电泳出来的条带总是这个样子,用的是1%的琼脂糖凝胶,电泳液为1倍的TBE,电压120V,电流90mA,以前也是这样的条件,结果都挺好的,现在不知道是怎么回事,大家帮忙看看吧,谢谢啦!
是不是胶泥的时间不够就拔梳子了?
跑的是什么样品啊?多大?
Zui好点个marker嘛
胶凝的很好了,应该不是这个问题吧
这是个actin,178bp,maker跑出来也是这样的。
可能是梳子比较厚 孔比较大 在加上PCR效果好 点样量多了 就成矩形状 你试试比较薄的梳子 少点点样品试试
不是用TAE吗?
178bp的你起码配个2%的胶来跑啦(2.5-3%胶都有人跑),点100bp或50bp的marker。
1%的胶适宜跑1-10kb的片段。
换琼脂糖了?要不就是缓冲液有问题,建议重新配一下缓冲液
上样量过大
上样量有点大,其他没啥问题吧。建议楼主把maker的图以及以前正常时的图也传上来看看哦。
可能是梳子比较厚 孔比较大 在加上PCR效果好 点样量多了 就成矩形状 你试试比较薄的梳子 少点点样品试试
好,O(∩_∩)O谢谢
不是用TAE吗?
我用的是TBE啦
178bp的你起码配个2%的胶来跑啦(2.5-3%胶都有人跑),点100bp或50bp的marker。
1%的胶适宜跑1-10kb的片段。
我试试看,O(∩_∩)O谢谢
换琼脂糖了?要不就是缓冲液有问题,建议重新配一下缓冲液
缓冲液都换过一遍了,还是这个样子
yzm869475747
这个染色的是啥呢
你这是吧样品 跑的都挤到一起了?
178bp的你起码配个2%的胶来跑啦(2.5-3%胶都有人跑),点100bp或50bp的marker。
1%的胶适宜跑1-10kb的片段。
想问下 是不是目的片段越小 用的胶浓度越大 我不太明白这个是为什么
难道溴酚蓝加少了或没混匀
片段越小需要用的胶浓度越大。因为胶浓度越大,形成的孔径就越小,这样才能将各种不同小片段的DNA分离开来,并达到一定的度。分子生物学实验手册有对应的表格。
不知道楼主的问题解决了没?如果解决了请和大家分享下原因哟,谢谢!
缓冲液换一下吧,估计用久了,离子浓度太高了
178bp的你起码配个2%的胶来跑啦(2.5-3%胶都有人跑),点100bp或50bp的marker。
1%的胶适宜跑1-10kb的片段。
试了一下,稍微好一点了,谢谢!
不知道楼主的问题解决了没?如果解决了请和大家分享下原因哟,谢谢!
好了,我换了3%的胶,电压降低到70V,缓冲液也统统重新配置跑出来就正常了
降低上样量,提高凝胶浓度
话说为什么是绿色的带啊?
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