显微镜之-石蜡切片的准备及需要的试剂一
所属分类:显微镜百科 点击次数:1284 发布日期:2019-07-24
在使用显微镜的时候,我们通常需要将样品切片,使样品非常薄,可以使之在显微镜的透射光源下透光率非常的好,那么石蜡切片就需要很好的技术和能力了,那么下面我们讲讲石蜡切片的准备工作及器材
1、准备工作
(一)洗涤实验所需器皿:(玻璃器皿的清洗)
1、 用洗衣粉将玻璃器皿表里擦洗干净反复洗刷
2、 将器皿在自来水下冲洗干净
3、 将器皿倒扣在铺有吸水纸或纱布的桌子上控干
注:一般情况下,经以上步骤后,用蒸馏水洗过1~3次即可烘干备用,如果做特殊染色还需浸泡在酸性清洁液内12~24小时,再经自来水彻底冲洗,再用蒸馏水过洗1~3次 烘干备用。
(二)配制: 硫酸洗液的配制
(三)载玻片与盖玻片的处理
1. 将所需载玻片与盖玻片清洗后,放入硫酸重铬酸钾溶液中浸泡24小时
2. 流水冲洗,再用蒸馏水冲洗3遍
3. 95%~酒精浸泡24小时,用绸布擦干备用
注:在将载玻片与盖玻片放入清洁液中时,要一片片地投入,使其不致重叠。
二、准备工作(二)常用液体的配制
(一)缓冲溶液:
1.磷酸盐缓冲液
A液:0.1mol/L磷酸二氢钠
B液:0.1mol/L磷酸氢二钠
A液与B液按比例混合调整到所需的PH值(3:7≈PH7.0)
2.枸椽酸缓冲溶液
A液:0.1mol/L枸椽酸
B液:0.1mol/L枸椽酸钠
A液与B液按比例混合调整到所需的PH值(6.2:42.8≈PH6.2)
(二)固定剂:
1.甲醛:10%甲醛
福尔马林 100ml
蒸馏水 900ml
注:实际甲醛含量只有3.6~4.0%但习惯上都将其视为10%。
2.10%中性福尔马林钙固定液
甲醛液 10ml
蒸馏水 90ml
加碳酸钙至过饱和(以容器底部碳酸钙沉淀1~2cm厚为适度)充分振荡混合后,放置24小时取上清液使用。
3.4%多聚甲醛:
8%多聚甲醛
多聚甲醛 8g
蒸馏水 100ml
加温至60℃左右,不时搅拌,成为乳白色溶液。滴加1N NaOH,并不停搅动至液体清明。
1N NaOH
lN等于1L溶液中某种物质1mol除以该物质的氢当量价所得数值的量
氧化钠(NaOH );分子量=40.005,当量价=1
1N Na0H的配制方法为:m=40.005/1=40.005g。取40.005gNaOH溶解于1L蒸馏水中
4%多聚甲醛
8%多聚甲醛 50ml
0.1M磷酸盐缓冲液 50ml
PH7.2
先取50 ml 8%多聚甲醛,用0.1M磷酸二氢钠和0.1M磷酸氢二钠将PH值调至7.2
4.Bouin液:
苦味酸饱和水溶液 75ml
36%~40%福尔马林液 25ml
冰醋酸 5m1
5.改良Bouin氏固定液
苦味酸饱和水溶液 45ml
95%酒精 45ml
36%~40%福尔马林液 5ml
冰醋酸 5m1
6.Carnoy液:
冰醋酸 10 m1
氯仿 30 m1
无水乙醇 60 m1
以上三者临用前混合,预冷至4℃后使用。24小时后固定液失效。
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