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显微镜之-石蜡切片的准备及需要的试剂一

所属分类:显微镜百科 点击次数:1284 发布日期:2019-07-24

 

在使用显微镜的时候,我们通常需要将样品切片,使样品非常薄,可以使之在显微镜的透射光源下透光率非常的好,那么石蜡切片就需要很好的技术和能力了,那么下面我们讲讲石蜡切片的准备工作及器材

1、准备工作

(一)洗涤实验所需器皿:(玻璃器皿的清洗) 
1、 用洗衣粉将玻璃器皿表里擦洗干净反复洗刷 
2、 将器皿在自来水下冲洗干净 
3、 将器皿倒扣在铺有吸水纸或纱布的桌子上控干 
注:一般情况下,经以上步骤后,用蒸馏水洗过1~3次即可烘干备用,如果做特殊染色还需浸泡在酸性清洁液内12~24小时,再经自来水彻底冲洗,再用蒸馏水过洗1~3次 烘干备用。 
(二)配制: 硫酸洗液的配制 
(三)载玻片与盖玻片的处理 
1. 将所需载玻片与盖玻片清洗后,放入硫酸重铬酸钾溶液中浸泡24小时 
2. 流水冲洗,再用蒸馏水冲洗3遍 
3. 95%~酒精浸泡24小时,用绸布擦干备用 
注:在将载玻片与盖玻片放入清洁液中时,要一片片地投入,使其不致重叠。
二、准备工作(二)常用液体的配制 
(一)缓冲溶液: 
1.磷酸盐缓冲液 
A液:0.1mol/L磷酸二氢钠 
B液:0.1mol/L磷酸氢二钠 
A液与B液按比例混合调整到所需的PH值(3:7≈PH7.0) 
2.枸椽酸缓冲溶液 
A液:0.1mol/L枸椽酸 
B液:0.1mol/L枸椽酸钠 
A液与B液按比例混合调整到所需的PH值(6.2:42.8≈PH6.2) 
(二)固定剂: 
1.甲醛:10%甲醛
福尔马林 100ml
蒸馏水 900ml 
注:实际甲醛含量只有3.6~4.0%但习惯上都将其视为10%。 
2.10%中性福尔马林钙固定液 
甲醛液 10ml 
蒸馏水 90ml 
加碳酸钙至过饱和(以容器底部碳酸钙沉淀1~2cm厚为适度)充分振荡混合后,放置24小时取上清液使用。 
3.4%多聚甲醛: 
8%多聚甲醛
多聚甲醛 8g 
蒸馏水 100ml 
加温至60℃左右,不时搅拌,成为乳白色溶液。滴加1N NaOH,并不停搅动至液体清明。 
1N NaOH 
lN等于1L溶液中某种物质1mol除以该物质的氢当量价所得数值的量 
氧化钠(NaOH );分子量=40.005,当量价=1 
1N Na0H的配制方法为:m=40.005/1=40.005g。取40.005gNaOH溶解于1L蒸馏水中
4%多聚甲醛 
8%多聚甲醛 50ml 
0.1M磷酸盐缓冲液 50ml 
PH7.2 
先取50 ml 8%多聚甲醛,用0.1M磷酸二氢钠和0.1M磷酸氢二钠将PH值调至7.2
4.Bouin液: 
苦味酸饱和水溶液 75ml 
36%~40%福尔马林液 25ml 
冰醋酸 5m1 
5.改良Bouin氏固定液
苦味酸饱和水溶液 45ml 
95%酒精 45ml 
36%~40%福尔马林液 5ml 
冰醋酸 5m1
6.Carnoy液: 
冰醋酸 10 m1 
氯仿 30 m1 
无水乙醇 60 m1 
以上三者临用前混合,预冷至4℃后使用。24小时后固定液失效。

 

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文章出处:老上光显微镜  网址:www.xianweijing123.com 欢迎转载 请标明出处


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