显微镜之-石蜡切片的准备及需要的试剂三
所属分类:显微镜百科 点击次数:1054 发布日期:2019-07-28
在使用显微镜的时候,我们通常需要将样品切片,使样品非常薄,可以使之在显微镜的透射光源下透光率非常的好,那么石蜡切片就需要很好的技术和能力了,那么下面我们讲讲石蜡切片的准备工作及器材
(四)其它
1.麻醉剂:
2~4%戊巴比妥钠,1ml/kg体重(45mg/kg)。
2.各级浓度酒精的配制
75%;85%;95%;酒精。75%和85%酒精用95%酒精配制;(取75ml95%酒精,加水至95ml,即为75%酒精)
3.盐酸洒精
多用于多种染色过程中的分色,如苏木精染色后分色。配法是在100ml的70%酒精内加0.5~1ml的浓盐酸(Hcl)。用盐酸酒精分色后要经自来水充分冲洗组织切片,去除所含的酸再作其他处理。
4.碘酒
取碘5g,溶于95%酒精80ml,再加入20ml蒸溜水即成
5.生理盐水
以氯化纳0.85~0.90g溶于100m1蒸馏水配成的生理盐水适用哺乳动物
石蜡切片基本步骤之二 取材 固定
三、取材,固定
(一) 实验动物的抓取及固定
1.小白鼠、大白鼠的抓取及固定方法
要点:(1)动作要轻缓;(2)不要突然袭击;(3)如发现动物的毛发竖起来时,更好停一会后再抓;(4)将四肢打开,固定在木板或方形蜡板上。
2.实验家兔的抓取及固定方法
要点:(1)随时抚摩其头部;(2)防止被其脚爪抓伤;(3)根据实验要求选择固定方法。
3.豚鼠的抓取及固定方法
要点:先用一只手扣住豚鼠背部,然后抓紧两耳间头颈部的皮肤,用另一只手托起臀部送到动物固定台上。
(二) 实验动物的编号、标记、分组和被毛去除方法
1.编号和标记方法
(1)染色法
标记溶液:3%~5%苦味酸 黄色
2%硝酸银 咖啡色(涂后光照10分钟)
0.5%中性红或品红 红色
龙胆紫 紫色
编号原则:先左后右,从前到后
左前脚为1,左侧腹为2,左后腿为3,头顶为4,腰背部为5,尾基为6,右前脚为7,右侧腹为8,右后腿为9。超过10可用不同的染色的标记液,一种染色为个位,另一种为十位数。
(2)挂牌法
(3)耳孔法
一般来说,小型动物适宜用耳孔法和染色法,中型动物适用于挂牌法。
2.实验动物的随机分组方法
动物实验时,常常需要将选择好的实验动物,按研究需要分成若干个组,分组时为了避免人为因素的影响,常应用随机数字表进行完全随机化的分组。
3.实验动物被毛去除方法
剪毛法
拔毛法
剃毛法
脱毛法:系用化学脱毛剂将实验动物被毛脱去,适用于无菌手术野的准备以及观察动物皮肤血液循环和病理变化。方法:将需脱毛部位的被毛先用弯头剪刀剪去,尽量剪短,勿剪破皮肤。然后用温水将该部位润湿,再用纱布包扎棉球的小棒蘸脱毛剂,在需脱毛部位涂一层,经2~3min后,用温水洗去该部位脱下的毛,自然晾干备用,切勿用纱布去擦,以免损伤皮肤。
脱毛剂配方:
(1)硫化钠3g
肥皂粉1g
淀粉7 g
加水适量调成糊状
(2)硫化钠8g
溶于100ml水中
(3)硫化钠8g
淀粉7 g
糖4 g
甘油5 g
硼砂1 g
加水75ml
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