显微镜之-石蜡切片的准备及需要的试剂八

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显微镜之-石蜡切片的准备及需要的试剂八

所属分类：显微镜百科点击次数：968 发布日期：2019-08-07

在使用显微镜的时候，我们通常需要将样品切片，使样品非常薄，可以使之在显微镜的透射光源下透光率非常的好，那么石蜡切片就需要很好的技术和能力了，那么下面我们讲讲石蜡切片的准备工作及器材

七、H-E染色
（一）步骤
1．脱蜡
二甲苯I 10分钟
二甲苯II 5分钟
2．水化
酒精I 5分钟
酒精II 5分钟
95%酒精I 5分钟
95%酒精II 5分钟
85%酒精 3分钟
75%酒精 2分钟
蒸馏水冲洗 1分钟
3．染色
苏木精染色 5分钟
自来水洗
盐酸酒精分化 15秒
自来水洗（镜检）
自来水洗 15分钟
0.5%伊红染色 1分钟
蒸馏水洗 2分钟
75%酒精 2分钟
85%酒精 2分钟
95%酒精I 5分钟
95%酒精II 5分钟
酒精I 5分钟
酒精II 5分钟
二甲苯I 5分钟
二甲苯II 5分钟
4．封片
中性树胶封片
上述处理好的玻片，取中性树胶滴入载玻片的组织上，取盖玻片从一端逐步盖下去，避免发生气泡
（二）注意事项
1．染色之前一定要了解清楚所用的染色液的配制方法，不同的染色液染色后的处理是不一样的。
2．染色过程中所用的时间要根据染色时的室内温度、染液的新鲜程度及实验室的实际情况等灵活掌握。在室温高、切片、染色液又是新配制的，染色时间就要短，反之时间就长。
3．伊红有水溶的和醇溶的，如果用的是水溶的，应该在脱水前进行染色，如果是醇溶的，应使用与溶解伊红等浓度的酒精开始脱水。
4．在二甲苯脱蜡之前可以先在60℃烤箱内0.5~1小时，这样可以使切片粘附更牢固不易脱片，也有利于脱蜡。
5．二甲苯在HE染色中有脱蜡、透明的作用。二甲苯脱蜡的好坏主要取决于切片在二甲苯内放置的时间和脱蜡时的温度以及二甲苯的使用次数。染好的切片必须经过透明，有利于显微镜观察，同时并为封片起到了桥梁作用。
6．用梯度酒精脱水时，在低浓度酒精中时间不宜过长，到高浓度时逐步延长脱水时间。以免脱水不彻底，影响二甲苯透明的效果。
7．在酸性分化液内停留的时间不要过长，分化不可过度，避免使细胞核内该染上色的结构脱色。不需分化处理的苏木精染色时要注意掌握染色时间，以防止组织切片染色背景过深或细胞核、胞质染色不足。

全节完

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